隨著病理學科的快速發展和精準診療時代的到來，病理診斷作為疾病診斷的金標準, 發揮著日益重要的作用。與此同時，精準治療的不斷進步，也推動了對病理科精準化、規范化檢測的發展。因此，甄選有效生物標志物以及病理檢測方法，是精準篩選出潛在獲益人群，并決定疾病治療成功與否的關鍵。

    近日，在第十二屆中國病理醫師年會召開之際，中國人民解放軍總醫院石懷銀教授、南京大學醫學院附屬鼓樓醫院樊祥山教授、天津醫科大學腫瘤醫院孟斌教授等專家共同出席了羅氏診斷的衛星會，圍繞微衛星不穩定性（MSI）及 EBV 檢測在病理診斷中的價值與應用等話題進行了深入的解讀和探討。

    石懷銀教授擔任會議主席并指出：隨著精準診療時代的到來，臨床對病理檢測的要求也越來越高，精確、高效、規范的病理診斷至關重要——病理及臨床醫生有必要了解相關鑒別及預后標志物的臨床意義，通過精準檢測綜合分析腫瘤的不同病理類型、基因突變情況、不同分期及患者個人狀況等制定出個體化診療方案，提升治療效果。

一、優選 MSI/MMR 檢測方法，助力腫瘤精準診療

    微衛星又稱簡單重復序列（SSR），是一些短而重復的 DNA 序列，一般由 1－6 個核苷酸組成，串聯重復排列。DNA 復制時插入或缺失突變引起的微衛星序列長度改變的現象，常由錯配修復（MMR）功能缺陷引起，稱為微衛星不穩定性（MSI）。

    MSI 現象于 1993 年被 Jacobs 等人在結直腸癌中首次發現，越來越多研究表明，MSI 與子宮內膜癌、結直腸癌、卵巢癌、胃癌、肝細胞癌、黑色素瘤腫瘤的發生密切相關，尤其是評估結直腸癌治療療效、預后以及制定輔助治療方案的重要生物標志物。

林奇綜合癥屬于最常見的遺傳性結直腸癌，發病年齡較年輕且患者預后較好，因此，應對新診斷的結直腸癌患者進行林奇綜合癥篩查，并對于高度懷疑為林奇綜合癥患者及其親屬進行相關基因胚系突變檢測來證實，以實現早篩查、早診斷、早治療的目的。樊祥山教授表示，此外，近年來，免疫治療相關研究發現，當腫瘤細胞中存在 MMR 缺失（dMMR）/MSI 時，腫瘤細胞內將累積大量基因突變，某些突變（新抗原）有可能被免疫系統識別和攻擊，從而對 PD-1 免疫治療有較好應答。因此，MSI/MMR 檢測除了可提供關鍵性診斷及預后信息，對于預測 PD-1 單抗免疫治療在癌細胞治療中的效益也具有重要價值。

    美國國立綜合癌癥網絡（NCCN）指南、中國臨床腫瘤學會（CSCO）指南均推薦所有結直腸癌患者進行 MMR 或 MSI 檢測。同時，在 2019 版的更新 NCCN 指南中，推薦 Pembrolizumab 用于 dMMR/MSI-H 結直腸癌、子宮內膜癌等實體腫瘤晚期治療，推薦 Nivolumab 用于 dMMR/MSI-H 結直腸癌晚期治療。

    目前，微衛星不穩定檢測方法包括 PCR 檢測 MSI、免疫組化檢測 MMR 蛋白及 NGS 檢測。樊祥山教授強調：綜合病理科情況，IHC 是病理實驗室檢測微衛星不穩定的首要篩查手段，建議使用 PMS2,MSH6,MLH1 和 MSH2 的抗體套餐來檢測 MMR 狀態。對有條件的實驗室，目前常用的 MSI 檢測方法是 PCR 結合 IHC 檢測，以保證檢測精準性。同時，在 MMR 的免疫組化檢測過程中應注意使用規范的判讀標準以及內外部對照。

二、EBER ISH 檢測有效輔助診斷 EBV 感染相關疾病

    EB 病毒（EBV）是一種嗜人類淋巴細胞的皰疹病毒，在人群中感染非常普遍。EBV 感染在不同感染狀態表達不同抗原：病毒增殖感染相關抗原包括 EBV 早期抗原（EA）、EBV 病毒殼抗原（VCA）和 EBV 膜抗原（MA）；病毒潛伏感染時表達的抗原有 EBV 核抗原（EBNA）和 EBV 潛伏膜蛋白（LMP），其中 LMP 包括 LMP1、LMP2，是目前唯一證實的 EBV 惡性轉化基因。

    EBV 感染口咽部上皮及局部浸潤 B 淋巴細胞，大量繁殖并進入血液循環而造成全身性感染，并可長期潛伏在人體淋巴組織中，形成記憶 B 細胞庫，當機體免疫功能低下時，潛伏的 EBV 活化可造成復發感染。EBV 感染與多種疾病相關，包括淋巴造血系統和非淋巴造血系統兩類：

    EBV 檢測除了在熟知的 NK/T 細胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌和胃癌等的診斷中使用，在其他一些相關疾病，尤其是 EBV 感染相關淋巴組織增殖性疾病中的應用不容忽視，在這些疾病中常常造成誤診或漏診。

    現階段可通過血清學檢測 EBV 相關抗體及病毒 DNA 拷貝數輔助診斷，對于病變組織檢測方法主要包括免疫組化（IHC）和原位雜交（ISH），孟斌教授強調：IHC 方法簡便易行，可檢測 LMP1 和 EBNA1 等 EBV 表達的蛋白抗原，但在不同感染狀態這些抗原表達不一，嚴重影響了檢測的敏感性。EBER 是 EBV 表達的小 RNA，在 EBV 各種感染狀態下都有表達，因此應用 ISH 方法檢測 EBER 對診斷 EBV 感染具有高度敏感性和特異性，是公認的診斷金標準，得到了包括 NCCN 在內的多個診療指南的推薦。